心肌祖细胞中Tbx5启动子区的组蛋白乙酰化调控机制研究

摘要：

目的 研究心肌祖细胞中Tbx5启动子区p300和CBP介导的组蛋白乙酰化修饰对Tbx5表达的调控及其修饰位点,探讨Tbx5的组蛋白乙酰化修饰调控网络.方法 体外培养胚胎心肌祖细胞,分为对照组、二甲基亚砜(DMSO)组和姜黄素组,对照组不给予额外干预,DMSO组给予DMSO干预,姜黄素组给予30 mmol/L姜黄素干预.同时,采用慢病毒载体转染胚胎心肌细胞48 h,分为对照组、GFP组和p300-RNAi组,对照组不转染,GFP组采用GFP慢病毒载体转染,p300-RNAi组采用p300-RNAi慢病毒载体转染.Western blot方法检测各组的组蛋白H3的乙酰化水平;实时荧光定量逆转录PCR检测各组Tbx5和p300 mRNA水平的表达;染色质免疫共沉淀(CHIP)-实时荧光定量逆转录PCR检测Tbx5启动子区组蛋白H3不同位点H3K4、H3K9和H3K27的乙酰化水平及Tbxt5启动子结合的p300和CBP水平.结果 姜黄素组Tbx5 mR-NA 相对表达水平及H3ac水平较对照组和DMSO对照组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).p300-RNAi组p300 mRNA相对表达水平、H3ac水平较GFP组和对照组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);3组Tbx5 mRNA相对表达水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05).与GFP组和对照组比较,p300-RNAi组H3ac、H3K4ac、H3K27ac水平降低,H3K9ac水平升高,差异有统计学意义(P＜0.05).p300、CBP均与Tbx5启动子区域相结合.与GFP组和对照组比较,p300-RNAi组p300结合水平降低,CBP结合水平升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Tbx5启动子区组蛋白乙酰化修饰受p300和CBP的双重调控,p300-RNAi介导的H3K4和H3K27低乙酰化对Tbx5表达的抑制作用,可被CBP介导的H3K9高乙酰化代偿,保证Tbx5的正确表达.

关键词：Tbx5、组蛋白乙酰化、p300、CBP、心肌祖细胞

所属期刊栏目：52

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：重庆市科技局面上项目cstc2019jcyj-msxmX0866

在线出版日期：2023-08-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1921-1925,1931