miR-148-3p抑制剂下调Akt2调控HUVECs细胞增殖及凋亡机制研究

摘要：

目的 探究微RNA(miR)-148-3p对模拟角膜新生血管形成常见体外细胞模型人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的增殖及凋亡的影响.方法 实验分2个阶段,第1阶段,HUVECs分为:空白对照组(以HU-VECs不作任何处理)、NC inhibitor组(转染NC inhibitor)、miR-148-3p inhibitor组(转染miR-148-3p inhibi-tor).采用CCK-8法检测抑制miR-148-3p表达对HUVECs增殖能力的影响;TargetScan筛选miR-148-3p潜在靶基因,双荧光素酶报告基因实验进行验证;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Akt2表达水平变化;第2阶段,HUVECs分为:NC组(转染过表达质粒Akt2的阴性对照)、Akt2组(转染过表达Akt2质粒);NC inhibi-tor组、miR-148-3p inhibitor组、miR-148-3p inhibitor+Akt2组(共转染miR-148-3p inhibitor和过表达Akt2质粒),采用CCK-8法检测miR-148-3p inhibitor和Akt2对HUVECs增殖能力的影响;采用末端DNA转移酶dUPT缺口末端标记(TUNEL)法检测各组细胞凋亡情况.结果 常规培养48、72、96 h,miR-148-3p inhibitor组中HUVECs增殖能力低于NC inhibitor组和空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-148-3p inhibi-tor组pMIR-Akt2-wt及pMIR-Akt2-Mut质粒荧光素酶活性与NC inhibitor组比较,差异无统计学意义(P>0.05),miR-148-3p inhibitor组Akt2表达水平低于NC inhibitor组(P<0.05);与NC组比较,Akt2组细胞增殖能力升高,凋亡指数(AI)值降低;常规培养48、72、96 h,与NC inhibitor组比较,miR-148-3p inhibitor组增殖能力降低,AI值升高;与miR-148-3p inhibitor组比较,miR-148-3p inhibitor+Akt2组增殖能力升高,AI值降低,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 miR-148-3p抑制剂可能通过下调Akt2抑制HUVECs增殖并促进凋亡.

关键词：miR-148-3p抑制剂、Akt2、人脐静脉内皮细胞、增殖、细胞凋亡

所属期刊栏目：51

分类号：R772.23(眼科学)

资助基金：国家自然科学基金81901765

在线出版日期：2022-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：3797-3802