自组装短肽Sciobio-Ⅱ通过Notch信号通路保护ox-LDL诱导的脐静脉内皮细胞凋亡

摘要：

目的 初步探索自组装短肽Sciobio-Ⅱ抑制氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的作用机制.方法 构建自组装短肽体系,体外培养HUVEC,分为5组并给予含不同试剂的DMEM完全培养基培养:control组(PBS)、ox-LDL组(200 mg/L ox-LDL)、Sciobio-Ⅱ组(150 mg/L Sciobio-Ⅱ)及ALL组(200 mg/L ox-LDL+150 mg/L Sciobio-Ⅱ)、LY组[200 mg/L ox-LDL+150 mg/L Sciobio-Ⅱ+25μmol/L血管内皮生长因子(VEGF)/Notch信号通路抑制剂LY450139].刚果红染色宏观定性观察短肽成胶能力;CCK-8试验检测各组细胞增殖;末端DNA转移酶dUTP缺口末端标记(TUNEL)、Annexin V/PI试验法检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)试验检测Bax、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Notch1、血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)基因及蛋白的表达情况.结果 刚果红染色结果表明Sciobio-Ⅱ可以自组装形成三维体系;细胞增殖结果显示:与control组比较,ox-LDL组的HUVEC增殖能力受抑制(P<0.05);与ox-LDL组比较,Sciobio-Ⅱ组、ALL组的HUVEC增殖能力提高,Sciobio-Ⅱ组高于ALL组(P<0.05).细胞凋亡实验结果:与control组比较,ox-LDL组细胞凋亡率增加(P<0.05);与ox-LDL组比较,Sciobio-Ⅱ组和ALL组细胞凋亡率均降低,Sciobio-Ⅱ组低于ALL组(P<0.05);qRT-PCR及Western blot实验(SYBR法)结果表明:ox-LDL组Bcl-2、VEGFR-2基因与蛋白表达水平低于control组,ALL组高于ox-LDL组,LY组低于ALL组;ox-LDL组Bax、Notch1基因与蛋白表达水平高于control组,ALL组低于ox-LDL组,LY组高于ALL组(均P<0.05).结论 自组装短肽Sciobio-Ⅱ可通过激活VEGF/Notch信号通路减轻ox-LDL引起的HUVEC凋亡.

关键词：自组装短肽、氧化低密度脂蛋白、人脐静脉内皮细胞、增殖、细胞凋亡

所属期刊栏目：51

分类号：R318.08(医用一般科学)

资助基金：浙江省义乌市科技计划项目;浙江省金华市科技计划项目

在线出版日期：2022-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：3786-3791