mTOR和JNK通路调节神经病理性大鼠杏仁核MCP-1表达的作用分析

摘要：

目的 探讨哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)通路对神经病理性疼痛(NP)大鼠杏仁核单核细胞趋化因子-1(MCP-1)表达的调节作用.方法 选取2月龄无特殊病原体(SPF)级健康雄性SD大鼠,采用脊神经结扎(SNL)左侧第5/6腰椎(L5/6)制备NP模型大鼠,假手术组仅暴露L5/6脊神经不结扎.实验分为3个部分:(1)将24只大鼠于SNL术前及术后第7、14和21天(d0、d7、d14和d21,各6只)取杏仁核,采用Western blot检测磷酸化mTOR(p-mTOR)、磷酸化JNK(p-JNK)表达情况并分析二者与MCP-1水平的相关性;(2)48只NP模型大鼠双侧杏仁核注射不同浓度mTOR抑制剂雷帕霉素或JNK抑制剂SP600125(浓度梯度均为0、0.1、1.0和10.0μmol/L),于d21取杏仁核(每个浓度各6只),采用ELISA检测MCP-1水平,免疫组织化学检测MCP-1阳性细胞数;(3)24只大鼠分为假手术组、模型组及抑制剂组(双侧杏仁核注射10μmol/L SP600125或雷帕霉素3μL),于d0、d4、d7、d14、d21共5个时间点测定各组的机械痛阈值(MWT).结果 与d0相比,d7、d14、d21 NP模型大鼠杏仁核中p-mTOR和p-JNK水平均升高(P<0.05),且d21水平最高;进一步分析发现,d21的NP模型大鼠杏仁核p-mTOR和p-JNK水平与MCP-1水平均呈正相关(r=0.564、0.629,P<0.05).杏仁核注射SP600125或雷帕霉素可降低MCP-1表达,与0μmol/L组相比,0.1～10.0μmol/L组的NP模型大鼠MCP-1水平及阳性细胞数均降低,差异有统计学意义(P<0.05),且10μmol/L组MCP-1水平及阳性细胞数最低.NP模型大鼠d4、d7、d14、d21杏仁核MWT均低于假手术组(P<0.05),经SP600125或雷帕霉素治疗后NP模型大鼠降低的MWT获改善,SP600125组或雷帕霉素组d7、d14、d21的MWT均高于模型组(P<0.05),但与对照组仍有明显差异(P<0.05).结论 NP大鼠mTOR和JNK通路激活,抑制mTOR和JNK通路可达到缓解NP大鼠疼痛及上调杏仁核MCP-1表达的作用,对于NP的治疗有一定意义.

关键词：神经病理性疼痛、杏仁核、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、c-Jun氨基端激酶、单核细胞趋化因子-1

所属期刊栏目：51

分类号：R741(神经病学与精神病学)

资助基金：湖南省自然科学基金项目;湖南省教育厅优青项目;湖南省卫健委课题;湖南省卫健委课题

在线出版日期：2022-11-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：3438-3444