核心蛋白聚糖在胰腺癌beta细胞功能中的作用及对线粒体分离融合的影响

摘要：

目的 探究核心蛋白聚糖(DCN)在胰腺癌组织中的表达及对胰岛beta细胞线粒体分离融合的影响.方法 征集21例胰腺导管腺癌(PDAC组)、25例胰腺神经内分泌肿瘤(PNET组)和4例健康者(健康组)胰腺组织;免疫组织化学检测胰腺组织中DCN表达;免疫荧光法检测胰腺组织中线粒体融合蛋白2(MFN2)和动力相关蛋白1(DRP1)表达情况;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测胰腺组织中DCN、线粒体分裂因子(MFF)、MFN1、MFN2、视神经萎缩症蛋白1(OPA1)、DRP1和线粒体分裂蛋白1(FIS1)表达;CCK-8法检测正常糖培养条件下DCN(0、1、10、100和200 nmol/L)处理对人胰岛β细胞(0、12、24和48 h)增殖的影响;胰岛β细胞分为2组:正常糖和高糖(HG)培养,均分别采用0 nmol/L和100 nmol/L DCN处理细胞24 h,CCK-8法再次检测各组细胞增殖,Annexin V/PI染色检测各组细胞凋亡,酶联免疫吸附实验检测各组细胞培养上清液中胰岛素分泌量,Western blot法检测MFF、MFN1、MFN2、OPA1、DRP1、FIS1、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(P22phox)、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38亚基(p-p38)、p38、胰岛素样生长因子Ⅰ受体蛋白(IGFIR)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)和AKT的表达.结果 与健康组比较,PDAC和PNET组癌组织中DCN、DRP1、FIS1和MFF表达水平明显降低,MFN1、MFN2和OPA表达水平明显升高(P<0.05);在正常糖条件下,100 nmol/L和200 nmol/L DCN处理24 h和48 h的细胞增殖倍数均明显高于对应时间点的0 nmol/L DCN组,且具有时间和剂量依赖性(P<0.05);在正常糖和HG条件下,100 nmol/L DCN组的细胞增殖倍数均明显高于0 nmol/L DCN组(P<0.05);在正常糖和HG条件下,100 nmol/L DCN组的AnnexinV+PI-细胞比例较0 nmol/L DCN组无明显变化(P>0.05);无论正常糖或是HG条件下,0 nmol/L DCN组IGFIR表达水平与100 nmol/L DCN组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);在正常糖条件下,100 nmol/L DCN组的培养上清液中胰岛素分泌量,细胞中DRP1、FIS1、MFF、P22phox、p-p38和p-AKT表达水平明显高于0 nmol/L DCN组(P<0.05),MFN1、MFN2和OPA表达水平低于0 nmol/L DCN组(P<0.05);在HG条件下,100 nmol/L DCN组培养上清液中胰岛素分泌量,细胞中P22phox和p-p38表达明显高于0 nmol/L DCN组(P<0.05),DRP1、MFN2和OPA表达明显低于0 nmol/L DCN组(P<0.05).结论 DCN可通过激活P22phox/MAPK通路调控胰岛β细胞的增殖、胰岛素分泌和线粒体融合分裂.

关键词：胰腺癌、核心蛋白聚糖、胰岛β细胞、线粒体分裂、线粒体融合、P22 phox/MAPK通路

所属期刊栏目：51

分类号：R576(消化系及腹部疾病)

资助基金：国家自然科学基金81702963

在线出版日期：2022-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1272-1278,1284