TLR4/PI3K调控内质网应激和自噬介导足细胞损伤的分子机制

摘要：

目的 探讨Toll样受体4(TLR4)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)通过调控内质网应激和自噬介导足细胞损伤的分子机制.方法 通过转化生长因子β1(TGF-β1)刺激小鼠肾足细胞系建立足细胞损伤模型,分别用TLR4-siRNA和3-甲基腺嘌呤(3-MA)处理该模型,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、葡萄糖调控蛋白(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、PI3K,以及自噬蛋白beclin-1和微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的水平.结果 TGF-β1诱导的小鼠肾足细胞损伤后TLR4、MyD88、CHOP、PI3K和GRP78的蛋白表达在6、12、24、36、48 h时间段明显升高,在刺激24 h后达到峰值,分别为0.57±0.07、0.65±0.06、0.50±0.04、2.01±0.18及2.09±0.17;与T G F-β1联合siRN A处理组比较,T G F-β1联合siRN A-T L R4处理组小鼠肾足细胞TLR4、MyD88、CHOP、LC3-Ⅱ、beclin-1、PI3K和GRP78蛋白水平明显降低或减弱,其水平分别为0.35±0.03、0.42±0.04、0.31±0.03、0.22±0.01、0.29±0.02、1.29±0.10及1.44±0.13;与T G F-β1组比较,TGF-β1联合应用PI3K特异性抑制剂(2.5 mmol/L 3-MA)组小鼠肾足细胞后结果显示PI3K的活化水平、自噬蛋白(LC3-Ⅱ和beclin-1)及内质网应激蛋白(CHOP和GRP78)显著减弱,其水平分别为0.24±0.02、0.33±0.01、0.42±0.02、1.25±0.11及1.21±0.12,而T L R4和M yD88的表达水平无显著性变化.结论 TLR4通过PI3K信号通路调控TGF-β1诱导小鼠肾足细胞损伤的内质网应激和自噬反应.

关键词：转化生长因子β1、足细胞损伤、TLR4/PI3K、自噬、内质网应激

所属期刊栏目：49

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：湖南省自然科学基金项目2018JJ2014

在线出版日期：2020-07-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1902-1906