CRISPR/Cas 9系统构建敲除FN表达的卵巢癌稳定表达细胞系研究

摘要：

目的 利用CRISPR/Cas 9系统在人卵巢癌细胞系OVCAR3中构建敲除纤维连接蛋白(FN)表达的稳定表达细胞系.方法 检测4株卵巢癌细胞系FN表达情况.使用E-CRISP网站设计针对FN基因的向导RNA(sgRNA)序列,将序列连接到lenti-CRISPR-V2质粒后转染高表达FN的OVCAR3细胞.鉴定构建的细胞系FN表达情况.结果 在4株细胞系中选择高表达FN的OVCAR3细胞转入测序结果正确的lenti-CRISPR-V2-FN-sgRNA重组质粒,q-PCR和Western blot方法验证结果显示,其成功降低了卵巢癌OVCAR3细胞的FN的表达水平.结论 CRISPR/Cas 9系统能建立敲除FN表达的卵巢癌稳定表达细胞系.

关键词：卵巢肿瘤、纤维连接蛋白、基因敲除技术、CRISPR/Cas 9

所属期刊栏目：49

分类号：R711(妇产科学)

在线出版日期：2020-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1737-1741,1745