靶向Plac1基因小分子干扰RNA的筛选及对肝癌细胞功能的影响

摘要：

目的 筛选有效沉默胎盘特异基因1(Plac1)的小分子干扰RNA(siRNA)序列,并研究其对肝癌细胞增殖和迁移的影响.方法 实时定量PCR(qPCR)及蛋白质印迹法(Western blot)检测不同肝癌细胞及正常肝细胞Plac1 mRNA及蛋白的表达;设计针对Plac1基因的3条干扰序列(Plac1-siRNA1,Plac1-siRNA2及Plac1-siRNA3)及1条阴性对照(NC-siRNA),转染肝癌细胞HepG2,同时进一步采用qPCR和Western blot分别检测转染后细胞Plac1 mRNA及蛋白的表达,采用CCK-8法检测肝癌细胞的增殖能力,Transwell实验检测细胞的迁移能力.结果 与正常肝细胞相比,Plac1在肝癌细胞中高表达,其中HepG2的Plac1表达水平最高(P<0.05),以此细胞作为实验模型.3条Plac1-siRNA转染HepG2细胞后,结果显示Plac1-siRNA1的沉默效果最好,能有效下调HepG2细胞Plac1 mRNA及蛋白的表达(P<0.05);并且转染后与NC-siRNA组比较,Plac1-siRNA1组的HepG2细胞增殖及迁移能力均明显降低.结论 成功设计及筛选能有效沉默肝癌细胞Plac1表达的siRNA序列,并且此序列有效抑制了Plac1的功能.

关键词：癌、肝细胞、胎盘特异基因、RNA干扰

所属期刊栏目：47

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：广东省科技计划项目2012B031800427;湛江市科技计划项目2013A01012

在线出版日期：2019-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：4588-4591