大鼠Hes1腺病毒表达载体构建及功能鉴定

摘要：

目的 构建高滴度大鼠Hes1腺病毒过表达载体(Ad-Hes1).方法 以大鼠cDNA文库为模板,PCR法扩增Hes1,通过定向克隆构建pShuttle-CMV-Hes1穿梭质粒,再以pShuttle-CMV-Hes1为基础,构建pAdeno-Hes1病毒质粒,将pAdeno-Hes1转染293细胞,包装Ad-Hes1,利用改进TCID50法进行病毒滴度测定.Ad-Hes1感染H9c2心肌细胞,Western blot检测Hes1表达.结果 pShuttle-CMV-Hes1穿梭质粒、pAdeno-Hes1病毒质粒构建成功,总滴度为1.6×1011 PFU,Ad-Hes1可在H9c2心肌细胞内正常表达,其MOI值为30.结论 Ad-Hes1包装成功,为进一步研究Hes1的心肌保护作用奠定实验基础.

关键词：腺病毒科、肌细胞、心脏、Hes1、质粒构建、病毒包装

所属期刊栏目：46

分类号：R511.8(传染病)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81570262;赣鄱555领军人才计划赣组字[2013]58号;江西省自然科学基金重大项目20152ACB20026

在线出版日期：2017-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：583-585