大鼠Hes1腺病毒干扰载体构建及功能鉴定

摘要：

目的 构建高滴度大鼠Hes1腺病毒干扰载体(Ad-Hes1-shRNA).方法 设计3对Hes1-shRNA寡核苷酸序列,通过定向克隆构建pHBAd-U6-CMV-Hes1-shRNA干扰质粒,将pHBAd-U6-CMV-Hes1-shRNA和pHBAd-BHG共转染293T细胞,以包装Ad-Hes1-shRNA,利用改进TCID50法进行病毒滴度测定.Ad-Hes1感染H9c2心肌细胞,Western blot检测Hes1表达.结果 pHBAd-U6-CMV-Hes1-shRNA构建成功,Ad-Hes1-shRNA包装顺利,滴度为1.0×1011 PFU/mL,并可在H9c2心肌细胞内发挥干扰效应.结论 Ad-Hes1-shRNA包装成功,在心肌细胞中具有Hes1的干扰效应.

关键词：腺病毒科、RNA干扰、寡核苷酸序列分析、Hes1、质粒构建、病毒包装

所属期刊栏目：45

分类号：R654.2(外科学各论)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81570262;赣鄱555领军人才计划赣组字[2013]58号;江西省自然科学基金重大项目20152ACB20026

在线出版日期：2017-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：4757-4759