热休克人羊膜间充质干细胞提取物与杀伤细胞共培养及抑瘤效应评价

摘要：

目的 将热休克人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)提取物与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养,以期提高早期CIK的增殖、分泌细胞因子及体外杀伤等能力,为得到高质量CIK提供研究基础.方法 (1)从外周血单个核细胞中常规诱导培养CIK;(2)热休克处理hAMSCs(42℃,1 h),48 h后收集上清液及胞内物质,将提取物与第10天CIK(370 μg:2×106个)共培养;(3)计数第12、14、17天CIK细胞数,绘制生长曲线;(4)酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞因子白细胞介素(IL)-2、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)的分泌量;(5)MTT法检测CIK对A549的体外杀伤活性.结果 (1)加入hAMSCs提取物的实验组增殖速度明显高于对照组,第12、14、17天CIK细胞数分别为[(5.26±0.01)×105/mL vs.(5.60±0.00)×105/mL)]、[(6.26±0.23)×105/mL vs.(9.37±0.15)×105/mL]、[(8.10±0.75)×105/mL vs.(11.00±1.67)×105/mL],差异有统计学意义(P＜0.05);(2) ELISA结果表明,hAMSCs提取物对早期CIK细胞分泌细胞因子有一定促进能力,两组第14天IL-2、TNF-α、IFN-γ量(pg/mL)分别为(13.49±0.78 vs.15.49±3.47)、(53.52±5.52 vs.33.83±15.61)、(60.68±19.39vs.50.24±18.89),差异无统计学意义(P＞0.05);(3) MTT结果:对照组与实验组IC50分别为(38.60±18.63 vs.25.62±8.39),差异无统计学意义(P＞0.05).结论 成功将热休克hAMSCs提取物与CIK共培养;共培养后显著促进了早期CIK的增殖活性.

关键词：杀伤细胞、人羊膜间充质干细胞、A549肺腺癌细胞、热休克

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分类号：R736.3(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81260397;贵州省科技厅科学技术基金资助项目黔科合J字[2013]2331号;遵义市科技局省市联合项目基金资助项目遵科合人20149号;贵州省教育厅高校优秀科技创新人才支持计划基金资助项目黔教合KY字[2015]495;遵义医学院博士启动基金资助项目0060616F-616

在线出版日期：2016-11-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：4033-4035,4040