小鼠原始生殖细胞分离培养方式和生物特性研究

摘要：

目的：探索一种简单高效的分离、培养小鼠原始生殖细胞（PGCs）的方法，为小鼠模型提供充足的PGCs来源。方法体外分离小鼠12.5 dpc胚胎生殖嵴，剪碎后用含血清、胰岛素-转铁蛋白-硒添加剂、卵泡刺激素、重组表皮生长因子的α-M EM培养基进行组织块贴壁培养；于倒置显微镜下观察细胞形态，采用流式细胞术检测阶段性特异性胚胎抗原，采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）、细胞免疫荧光等方法检测干细胞的多能性基因Oct4及减数分裂Ⅰ期的几个特异性基因的表达。结果体外分离培养的小鼠 PGCs具有良好的细胞形态、极强的增殖能力，SSEA-1表达阳性，SSEA-4表达阴性，同时检测到Oct4、Stra8、Vasa、SCP3、ZP3表达均为阳性。结论利用该实验方法能培养出高纯度、具有良好干性及极强增殖能力的小鼠PGCs ，并使该细胞进入减数分裂。

关键词：小鼠原始生殖细胞、细胞培养、减数分裂

所属期刊栏目：45

分类号：Q813.1(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金项目资助31101058；重庆市自然科学基金资助项目CSTC2011jjA10075。

在线出版日期：2016-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1159-1162