10.3969/j.issn.1671-8348.2015.35.009
miRNA-29a对平滑肌细胞增殖凋亡的影响
目的:检测miRNA‐29a在腹主动脉瘤患者与正常人血清中的表达差异,探讨miRNA‐29a过表达对人腹主动脉平滑肌细胞(HVSMCs)增殖凋亡的影响。方法收集该院2011年3月至2014年3月间确诊腹主动脉瘤患者血清标本25例,平均年龄(62.9±13.6)岁;同期收集与其年龄相匹配的正常老年人血清标本25例,平均年龄(61.5±11.8)岁。用RT‐PCR分别检测其miRNA‐29a表达。构建人重组慢病毒载体MCS‐CMV‐miRNA;将构建载体MCS‐CMV‐miRNA‐29a转染HVSMCs细胞,荧光显微镜下观察其转染效率,RT‐PCR及Westernblot法检测转染后各组细胞中miRNA‐29a和miRNA‐29a靶基因COL1A1的表达,最后应用AnnexinV/7‐AAD双染法检测转染后72h对HVSMCs细胞凋亡的影响。结果在腹主动脉瘤患者中miRNA‐29a表达较正常人低。构建的重组慢病毒载体MCS‐CMV‐miRNA‐29a转染效率为(74.25±10.10)%,转染后miRNA‐29a及蛋白表达在靶细胞较对照组增多,MTS及AnnexinV显示miRNA‐29a过表达后细胞增殖增多,凋亡减少。结论成功构建携带miR‐NA‐29a慢病毒载体,转染后miRNA‐29a稳定表达,miRNA‐29a过表达可促进细胞增殖,抑制其凋亡。
主动脉瘤、腹、miRNA-29a、慢病毒载体、肌细胞、平滑肌
R654.4(外科学各论)
2016-03-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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