人AQP1-shRN A 表达质粒载体的构建与筛选

摘要：

目的：构建针对人水通道蛋白1（AQP1）基因的shRNA表达质粒载体，并验证其干扰效果，为进一步探讨AQP1基因对人乳腺癌细胞的作用及机制建立基础。方法设计合成4对针对人AQP1基因不同位点的shRNA片段，通过DNA重组技术将其插入载体GV115中，构建AQP1‐shRNA重组质粒，转染人乳腺癌MCF‐7细胞，并通过实时荧光定量 PCR（RT‐PCR）和Western blot法检测干扰效率。结果 RT‐PCR法证实AQP1在乳腺癌 MCF‐7细胞中有表达。测序验证表明4对靶向AQP1‐shRNA表达载体均构建成功。4组干扰载体能够从基因和蛋白表达水平不同程度抑制 AQP1表达，其中以AQP1‐shRNA 4对AQP1的干扰效率最强。结论成功有效地构建了针对人AQP1基因的shRNA重组质粒，能够有效抑制人乳腺癌细胞MCF‐7中A Q P1的表达。

关键词：乳腺肿瘤、人水通道蛋白1、shRNA

分类号：R73-36+2(肿瘤学)

资助基金：陕西省教育厅专项科研计划项目12JK0768。

在线出版日期：2015-11-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：4183-4186