抗鼻咽癌质粒 pFY 转化和菌种筛选的研究

摘要：

目的：筛选携带抗鼻咽癌质粒 pFY 的稳定高产菌株。方法以 CaCl2法制备大肠杆菌 JM109感受态,将抗鼻咽癌质粒 pFY 转化 JM109感受态,对琼脂平板上获得的菌落进行筛选,选出符合标准的单菌落为菌种,进行菌种稳定性实验。用质粒提取试剂盒检测质粒含量。将抗鼻咽癌质粒 pFY 转染到细胞 CNE-2中,四氮唑蓝(MTT)比色法观察转染试剂及质粒载体对细胞生长增殖的影响。结果筛选得到菌株的培养液中质粒 DNA 含量为30 mg/mL,超螺旋 DNA 比例为92%。经电泳和酶切鉴定,该菌株的50子代所携带质粒与原代一致。质粒 pFY 对 CNE-2细胞株生长有明显的抑制作用。结论成功筛选出携带抗鼻咽癌质粒 pFY 的稳定高产菌株,为大批量制备临床应用级质粒奠定了基础。

关键词：鼻咽肿瘤、感受态细胞、质粒、转化、筛选

分类号：R739.6(肿瘤学)

资助基金：广东省医学科研基金资助项目A2013687;广东省大学生创新创业训练计划项目1184713046

在线出版日期：2015-10-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：3613-3615