骨形成蛋白9腺病毒表达载体的构建及鉴定

摘要：

目的 构建骨形态发生蛋白9 (BMP9)基因腺病毒表达载体及稳定产毒细胞系,为观察其对T2DM糖、脂代谢异常的干预效应奠定基础.方法 质粒pCMV/BMP9双酶切克隆至腺病毒载体Ad5.F,构建重组腺病毒表达载体Ad5.BMP9.F,酶切测序鉴定;转包装细胞,经抗性筛选检测病毒滴度,挑选滴度较高的稳定产毒细胞克隆进行逆转录PCR(RT-PCR)鉴定.结果 建立BMP9基因腺病毒表达载体Ad5.BMP9.F经酶切及测序证实目的基因插入位点及读码框架正确;建立稳定产毒细胞克隆最高病毒滴度达7.4×105 CFU/mL,RT-PCR证实BMP9基因整合其中并稳定表达.结论 成功构建含BMP9基因的腺病毒表达载体及其稳定产毒细胞系.

关键词：骨形成蛋白质类、腺病毒科、糖尿病、2型

所属期刊栏目：44

分类号：Q781(基因工程（遗传工程）)

资助基金：重庆市医学科技计划项目2010-2-238

在线出版日期：2015-08-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：2318-2319,2323