慢病毒载体介导CG RP基因体外转染及对M SC生物学特性的影响

摘要：

目的：探讨慢病毒载体介导降钙素基因相关肽（CGRP）基因体外转染间充质干细胞（MSC）及其对MSC生物学特性的影响。方法大鼠MSC进行分离、培养及鉴定。CGRP重组慢病毒转染MSC后，采用荧光显微镜和流式细胞技术测定其转染率。实时定量PCR、免疫荧光细胞化学及ELISA法检测MSC中CGRP的表达。慢病毒转染后通过MTT、β‐半乳糖苷酶染色和诱导分化评价MSC的增殖、衰老及分化能力。结果慢病毒载体介导CGRP基因转染 MSC后48 h可稳定表达，MOI＝30时，转染率达80％以上。与MSC组和空载病毒转染（MSC‐EGFP组）比较，CGRP修饰的MSC（MSC‐CGRP组）中CGRP的mR‐NA和蛋白表达水平增高（均 P＜0．01）。MTT、β‐半乳糖苷酶染色和诱导分化结果显示，病毒转染后对MSC增殖、衰老及向内皮分化基本没有影响。结论 MSC是一种理想的基因载体细胞，可作为CGRP基因转染的靶细胞用于基因治疗，为后续体内、体外实验奠定基础。

关键词：降钙素基因相关肽、转染、间充质干细胞、生物学特性

分类号：R543.4(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81060014。

在线出版日期：2015-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1873-1875,1878