卡波氏肉瘤相关疱疹病毒ORF65抗体的制备及其特异性检测

摘要：

目的：制备高效价卡波氏肉瘤相关疱疹病毒（KSHV）病毒ORF65衣壳蛋白抗体并检测其特异性。方法将人工合成的ORF65蛋白抗原肽经弗氏佐剂乳化，在家兔背部、颌下等皮下多点免疫注射，间隔2周免疫，共4次。末次免疫后1周取兔血清，ELISA法检测兔免疫血清抗体IgG抗体水平。进一步采用免疫荧光、Western blot检测制备的抗血清中与ORF65结合的特异性。结果家兔在全程免疫后产生了高效价的特异性抗体，最高滴度达1∶12800。免疫荧光检测显示，与未经佛波酯（TPA）刺激的BCBL‐1细胞相比，兔抗血清主要结合于BCBL‐1细胞胞质，与ORF65蛋白在细胞内表达位置一致。Western blot结果显示在21 kD处有特异性蛋白条带，其大小与预期的ORF65蛋白大小相符，同时经T PA刺激的BCBL‐1细胞中ORF65蛋白表达量高于对照组，与ORF65蛋白裂解期蛋白的特性相符。结论用ORF65衣壳蛋白抗原肽段免疫家兔，可成功制备高效价的特异性抗血清，该抗体可与KSHV病毒ORF65蛋白特异性结合。

关键词：卡波氏肉瘤相关疱疹病毒、ORF65、抗体、免疫性

分类号：R737(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81071345，81160535；广西壮族自治区教育厅桂教科研基金资助项目201204LX324，2013YB183；广西自然科学基金资助项目2014GXNSFAA118136。

在线出版日期：2015-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1091-1093,1096