10.3969/j.issn.1671-8348.2015.02.037
乙型肝炎病毒c抗原特异性T细胞系的建立及CTL克隆的筛选
目的:建立乙型肝炎病毒(HBV)抗原特异性T细胞系,并筛选得到抗原肽特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)克隆。方法通过流式细胞染色方法鉴定出1例急性乙型肝炎患者的人类白细胞分化抗原(HLA)为HLA‐A2型,分离患者外周血单个核淋巴细胞(PBMCs);用重组人HBVc抗原(HBcAg)刺激PBMCs建立抗原特异性T细胞系;用HBcAg抗原肽刺激和有限稀释方法,筛选出HBcAg抗原肽特异性CTL克隆;以固相酶联免疫斑点技术(ELISPOT)和乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒试验对HBcAg特异性T细胞系和CTL克隆进行功能鉴定。结果建系后HBcAg特异性T细胞明显得到富集,有限稀释后获得15株CTL克隆,其中14株表现出明显的HBcAg抗体肽特异性,包括抗原肽Core18‐27特异性CTL克隆8株,抗原肽Core107‐115特异性CTL克隆4株,另外2株CTL克隆对2条HBcAg抗原肽有交叉反应性。结论成功建立HBcAg抗原特异性T细胞系和CTL克隆,为后续试验奠定基础。
肝炎病毒、乙型、T淋巴细毒、细胞毒性、T淋巴细胞、肝炎核心抗原
R373.2(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2015-02-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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