10.3969/j.issn.1671-8348.2015.01.005
Peroxiredoxin2基因RNAi慢病毒载体构建及对SW480细胞增殖的影响
目的:构建Peroxiredoxin2(PRDX2)基因RNA干扰(RNAinterference,RNAi)慢病毒表达载体,探讨PRDX2基因干扰后对结直肠癌SW480细胞增殖的影响。方法设计、合成靶向PRDX2的RNA干扰的序列,构建pGC‐EGFP‐shPRDX2慢病毒载体并进行鉴定,同时应用qRT‐PCR和Westernblot方法观察转染的SW480结肠癌细胞PRDX2mRNA和蛋白表达的抑制效果,并通过MTT、平板克隆形成实验检测细胞增殖变化。结果成功构建PRDX2基因慢病毒载体并经测序证实;pGC‐EGFP‐shPRDX2可有效抑制结直肠癌SW480细胞PRDX2的表达,感染慢病毒的SW480细胞中PRDX2mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);SW480细胞经PRDX2RNA干扰后其生长和增殖能力显著降低(P<0.05)。结论PRDX2基因RNAi慢病毒表达载体在SW480细胞中表达稳定可靠,PRDX2基因干扰后有效抑制了结直肠癌SW480细胞的增殖和生长,为进一步探讨PRDX2在结直肠癌发生、发展及转移中的作用奠定基础。
结直肠肿瘤、基因表达、绿色荧光蛋白质类、过氧化还原蛋白2、慢病毒载体
R735.3(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目81172295。
2015-02-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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