人朊蛋白基因真核表达载体的构建及鉴定

摘要：

目的：构建人朊蛋白基因（PRN P ）真核表达重组质粒。方法从阿尔茨海默病（AD ）患者外周血白细胞中提取总RNA ，利用RT-PCR的方法扩增编码人PRNP的基因片段，应用基因重组技术将人 PRNP基因片段克隆到真核表达载体pEG-FP-N2中，经XhoⅠ及EcoRⅠ双酶切、单酶切及基因序列测定证实所构建的载体。结果 RT-PCR方法获得人PRNP的基因片段，限制性内切酶酶切分析、PCR法及序列测定证实为正确重组质粒，并且该重组载体能够在SH-SY5Y细胞中表达。结论构建的真核表达重组质粒pEGFP-N2-PRNP通过鉴定，结构正确，为后续研究PRNP的生物学功能奠定了基础。

关键词：阿尔茨海默病、朊蛋白基因、pEGFP-N2真核表达载体

分类号：R592(全身性疾病)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81100246；海南省自然基金资助项目811204；海口市重点科技计划项目2013-52。

在线出版日期：2014-08-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：2434-2436