MACC1基因shRNA 慢病毒表达载体的构建及转染MB-231细胞

摘要：

目的：构建结肠癌转移相关基因1（MACC1）RNAi慢病毒表达载体，并转染人乳腺癌细胞株MB-231，观察其最佳感染条件。方法设计并合成MACC1基因特异性的DNA寡核苷酸，连接到经AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切线性化的pMAGic慢病毒质粒载体中，转化大肠埃希菌DH5a感受态细胞，筛选阳性菌落、扩增后提取质粒，进行DNA测序鉴定。用293FT 细胞包装产生慢病毒，感染MB-231细胞，选择感染效率高、感染复数（MOI）低的感染条件。结果 PCR与测序鉴定证实成功构建了 MACC1 RNAi的慢病毒载体，可以高效转染MB-231细胞，其最佳感染条件为MOI＝40。结论成功构建了MACC1 RNAi慢病毒表达载体，其可高效感染MB-231，为进一步研究靶向 MACC1 RNAi对乳腺癌细胞恶性生物学行为变化及基因治疗研究奠定了实验基础。

关键词：结肠癌转移相关基因1、RNA干扰、慢病毒载体、人乳腺癌细胞株MB-231

分类号：R39;R73

在线出版日期：2014-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1474-1475,1479