结核杆菌热休克蛋白70作为表位肽载体体外诱导 HBV 特异性免疫应答

摘要：

目的：在体外研究结核杆菌热休克蛋白70（TB ．HSP70）作为乙型肝炎病毒（HBV）核心抗原（HBcAg）细胞毒性T 淋巴细胞表位肽载体，诱导 HBV 特异性免疫应答。方法应用毕赤酵母分泌表达 HSP70（P1）、HSP70-HBcAg （18-27）（P2）、HSP70-PreS2B （18-24）-PreS2Th（37-53）-HBcAg（18-27）（P3），用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白免疫印迹法鉴定各重组蛋白的表达。体外考察重组蛋白（P1、P2、P3）对慢性乙型肝炎外周血来源的树突状细胞和淋巴细胞的作用，流式细胞术评估树突状细胞的成熟，酶联免疫吸附测定法检测细胞因子白细胞介素（IL ）-12p70、IL-1β、肿瘤坏死因子-α（T N F-α）、干扰素-γ（IFN-γ）分泌情况，TdR-3H掺入法检测淋巴细胞的增殖情况，应用经典51 Cr法检测重组蛋白诱导 HBV特异性细胞毒活性。结果重组蛋白P1、P2、P3构建成功，P1、P2、P3能诱导树突状细胞成熟，上调 CD1a、CD40、CD86表达，释放 T h1型细胞因子 IL-12p70、IL-1β和 TNF-α，P3最能有效激活自体淋巴细胞成为细胞毒活性细胞，促进淋巴细胞增殖和IFN-γ的释放，而单独的HSP70无杀伤活性。结论 TB ．HSP70可作为HBV HBcAg细胞毒性T 淋巴细胞表位肽载体，提高T 淋巴细胞表位肽的免疫原性，且含有B、T h表位的P3能更好地激活HBV特异性免疫应答。

关键词：HSP70热休克蛋白、T淋巴细胞、乙型肝炎病毒、树突细胞

分类号：R3 ;R5

资助基金：国家自然科学基金资助项目30300297；重庆市自然科学基金资助项目2008BB5402。

在线出版日期：2014-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1025-1028