人AQP5真核表达质粒的构建及其在胃癌细胞中的表达

摘要：

目的 构建人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒,观察水通道蛋白5(AQP5)基因在胃癌AGS细胞中的稳定表达.方法采用基因重组技术将人AQP5 cDNA插入真核表达载体pcDNA3.1/myc-His,构建人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒.脂质体介导空载体pcDNA3.1/myc-His和表达质粒pcDNA3.1-AQP5/myc-His分别转染人胃癌AGS细胞株,G418筛选,挑取阳性克隆,扩大培养,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)分别检测AQP5 mRNA和蛋白表达.结果 双酶切和基因测序结果均证实人pcDNA3.1-AQP5/myc-His真核表达质粒构建成功.AQP5转染组与空白对照组、空载体组比较,AQP5 mRNA表达显著增加(P<0.05),AQP5蛋白表达显著上调(P<0.05).结论 成功构建人AQP5真核表达质粒并获得稳定表达AQP5基因的胃癌AGS细胞系,为进一步研究AQP5蛋白对胃癌恶性表型的影响奠定实验基础.

关键词：胃肿瘤、水通道蛋白质5、转染

所属期刊栏目：42

分类号：R73;S83

在线出版日期：2013-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：407-409