RNAi介导的IBP表达抑制对人乳腺癌MDA-MB-231细胞细胞骨架的影响

摘要：

目的 研究干扰素调节因子4结合蛋白(IBP)的表达抑制对人乳腺癌MDA-MB-231细胞中微丝、微管的影响.方法 设计并合成针对人IBP mRNA的RNA干扰(RNAi)序列,构建RNAi慢病毒表达载体,与包装质粒共转染人胚肾293FT细胞获得病毒颗粒,以病毒感染MDA-MB-231细胞.采用免疫印迹及实时聚合酶链反应(RT-PCR)确定能有效抑制IBP的RNAi序列,筛选出获得稳定感染的细胞株并进行微丝、微管染色.结果 成功构建了IBP特异性的RNAi慢病毒表达载体和对照载体,对MDA-MB-231细胞IBP的沉默效率为69.9%;通过微丝、微管染色证实IBP表达下调后,细胞形态出现明显变化,细胞体增大,丝状伪足减少,片状伪足增多,微管排列紊乱.结论 IBP蛋白通过影响微管、微丝的排列而改变MDA-MB-231细胞生物学行为.

关键词：转染、RNA干扰、慢病毒感染、细胞骨架、基因、IBP

所属期刊栏目：42

分类号：R39;R73

资助基金：国家自然科学基金资助项目30901458;第三军医大学回国人员科研启动基金资助项目2009XHG06

在线出版日期：2013-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1-5