肝癌石蜡包埋组织miRNA提取方法的优化

摘要：

目的 改进并优化从肝癌(HCC)甲醛固定石蜡包埋组织(FFPE)提取并检测微小RNA(miRNA)的方法.方法 使用miRNeasy FFPE试剂盒探讨提取HCC石蜡组织miRNA最佳切片厚度及蛋白酶K作用时间.实时定量RT-PCR检测miR-221、miR-146a、let7-a、miR-191、miR-103及RNU6B的表达量.将HCC细胞制成石蜡组织,对比同一细胞系新鲜细胞及石蜡包埋细胞的各个miRNA表达量差异.结果 切片厚度30 μm,蛋白酶K作用时间48 h时提取miRNA效果最佳.各HCC细胞系及临床HCC石蜡组织均有不同水平的miRNA-221、miR-146a、let7-a、miR-191、miR-103及RNU6B表达.同一细胞系新鲜细胞与石蜡包埋后的各miRNA表达无明显差别.结论 改良后的miRNeasy FFPE 提取方法能提取石蜡组织中的miRNA,可重复性强,可推广用于临床各种石蜡包埋组织的miRNA提取.

关键词：微RNAs、甲醛、石蜡包埋、肝肿瘤、逆转录聚合酶链反应

所属期刊栏目：41

分类号：R73;R28

资助基金：广西自然科学基金资助项目2010GXNSFB013059

在线出版日期：2013-01-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：3623-3625