10.3969/j.issn.1671-8348.2012.34.003
骨桥蛋白抑制FHIT表达促进结肠癌细胞增殖存活
目的 构建骨桥蛋白(OPN)基因真核表达载体,转染人结肠癌细胞SW480,研究其对SW480细胞增殖及生存能力的作用机制.方法 构建重组表达载体pEGFP-N1/OPN,转染人结肠癌SW480细胞.采用RT-PCR及免疫印迹法(Western blotting)分别检测SW480细胞OPN基因及蛋白表达量;Cell Counting Kit- 8(CCK-8)测定细胞增殖;软琼脂克隆形成实验观察细胞的锚定非依赖性生长能力.Western blotting检测脆性组氨酸三联体基因(FHIT)和蛋白激酶B(PKB/Akt)蛋白在SW480细胞中的表达.结果 重组质粒pEGFP-N1/OPN转染SW480后,OPN基因获得很好转录,OPN蛋白表达增高,细胞增殖率(光吸收值)显著高于转染阴性组(P<0.05),细胞软琼脂克隆形成速度增快,数量明显多于对照组和空载体组(P<0.05);FHIT蛋白在实验组表达降低,Akt蛋白在各组中的表达无显著性差异.结论 OPN基因通过抑制FHIT基因表达,促进SW480细胞增殖、独立存活能力.
骨桥蛋白质、结肠肿瘤、脆性组氨酸三联体基因
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R73;S56
四川省科技厅科研项目07JY029-134;四川省教育厅科研项目07ZB110
2013-01-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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