NF-κB基因RNA干扰质粒的构建与鉴定

摘要：

目的 构建转录因子NF-κB的RNA干扰(RNAi)质粒,为研究NF-κB参与的细胞信号通路及以其为靶点的基因治疗提供稳定转染的RNAi质粒.方法 设计针对NF-κB的shRNA特异性序列,应用基因重组技术克隆到pSilencer 1.0-U6表达载体,EcoRⅠ和ApaⅠ双酶切及DNA测序鉴定重组克隆;脂质体转染RNAi重组载体至前列腺癌细胞PC-3后,Western blot分析各组NF-κB蛋白表达水平.结果 双酶切和DNA测序证实shRNA正确插入pSilencer 1.0-U6质粒; Western blot结果显示与空质粒对照组比较NF-κB转染组细胞NF-κB表达明显下调.结论 成功构建人NF-κB基因RNAi质粒,为研究NF-κB参与的细胞信号通路提供了稳定转染细胞的干扰质粒,为靶向NF-κB的基因治疗提供了有力工具.

关键词：核因子-κB、RNA干扰、质粒

所属期刊栏目：41

分类号：R73;R85

资助基金：国家自然科学基金青年基金资助项目31101003;广东省医学科学技术研究基金资助项目B2011134;广州医学院博士基金资助项目2010C01

在线出版日期：2013-01-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：3504-3505,3508