螺内酯对清蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响

摘要：

目的 探讨螺内酯对人清蛋白诱导的人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞)发生转分化的影响,以及该过程是否通过转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads信号通路发挥作用.方法 体外培养HK-2细胞,将其随机分为7组:A组(未加刺激物)、B组(加入10-7 mol/L 螺内酯)、C组(加入5 mg/mL清蛋白)、D组(加入5 mg/mL清蛋白及10-8 mol/L螺内酯)、E组(加入5 mg/mL清蛋白及10-7 mol/L 螺内酯)、F组(加入5 mg/mL清蛋白及10-6 mol/L 螺内酯)、G组(先加10 μmol/L TGF-β1拮抗剂,30 min后加入5 mg/mL 清蛋白).采用RT-PCR检测TGF-β1和整合素连接激酶(ILK)的mRNA表达;细胞免疫荧光检测上皮钙黏素(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;ELISA法检测纤维连接蛋白(FN)的蛋白水平.结果 C组ILK mRNA,α-SMA、FN蛋白较其他各组表达明显增高(P<0.05),E-cadherin蛋白表达明显下降(P<0.05),而TGF-β1 mRNA表达高于除G组以外其余各组(P<0.05).与G组相比,C组TGF-β1 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),而ILK mRNA,α-SMA、FN蛋白表达明显下降(P<0.05),E-cadherin表达明显升高(P<0.05).D、E、F组TGF-β1、ILKmRNA、α-SMA,FN蛋白表达逐渐下降,组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05);E-cadherin的表达逐渐增高(P<0.05).结论 一定浓度的清蛋白可以诱导体外培养的HK-2细胞发生转分化;螺内酯可抑制人清蛋白诱导HK-2细胞转分化作用,且呈剂量依赖性;TGF-β1/Smads信号通路可能是此过程中的重要通路.

关键词：螺内酯、肾小管、上皮细胞、细胞分化、转化生长因子β

所属期刊栏目：41

分类号：R73;R97

资助基金：江西省卫生厅科技计划20121077

在线出版日期：2012-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1799-1801,1804