10.3969/j.issn.1671-8348.2012.17.002
小鼠脑动脉平滑肌钙激活钾通道基本特性和动力学调控研究
目的 采用膜片钳技术记录小鼠脑动脉平滑肌细胞上的大电导钙激活钾通道(BKCa)和自发瞬时外向电流(STOCs),研究了其基本特性以及钙离子对通道动力学的调控.方法 采用两步法急性酶分离小鼠脑动脉,得到单个平滑肌细胞.使用200 μg/mL两性霉素B为穿孔剂进行穿孔全细胞膜片钳实验,包括全细胞宏观电流记录和STOCs记录,采用inside-out和outside-out构型进行单通道电流记录.结果 BKCa宏观电流和STOCs能够被BKCa的特异性阻断剂IbTX(200 nmol)阻断.BKCa单通道具有明显电压依赖性(半数最大激活电压V1/2=78.09 mV)、K+选择性和钙敏感性(Ca2+解离常数Kd=0.881 μmol),能够被胞外IbTX阻断.胞内Ca2+调控通道动力学特性主要表现为减少了开放时间常数,促进了通道由关闭向开放的转变.结论 BKCa宏观电流和STOCs非常容易记录,单通道活性好,具有BKCa的电生理学特性.小鼠脑动脉平滑肌是研究BKCa功能活动和血管活性药物作用机制的良好实验标本.
血管平滑肌、大电导钙激活钾通道、动力学、钙调控
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R64;R74
国家自然科学基金资助项目30370527,30670763
2012-07-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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