HIV-1P24蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备

摘要：

目的 制备HIV-1 P24蛋白及单克隆抗体,建立酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测HIV感染.方法 聚合酶链反应(PCR)扩增p24基因,并将其克隆到原核表达载体pET-28a(+)中,经E.coli表达并纯化HIV-1 P24蛋白.以纯化P24蛋白抗原免疫Balb/c小鼠,取其脾淋巴细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合,制备能产生P24单克隆抗体的杂交瘤细胞株,采用Western blot、ELISA技术对制备的单克隆抗体进行初步鉴定,建立检测P24蛋白含量的ELISA竞争法.结果 原核表达重组质粒在E.coli中能高效表达P24蛋白,从杂交瘤细胞中选取能稳定分泌P24单克隆抗体的杂交瘤细胞株,用ELISA竞争法检测HIV-1阳性的血清中P24蛋白含量与病毒载量显著相关.结论 P24蛋白及特异性单克隆抗体成功制备,并建立了检测P24蛋白含量的ELISA竞争法.

关键词：免疫缺陷病毒、质粒、抗体、单克隆、酶联免疫吸附测定

所属期刊栏目：41

分类号：S85;R73

在线出版日期：2012-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：696-698