化脓性链球菌高毒力株特异基因文库的构建和分析

摘要：

目的 构建化脓性链球菌高毒力株特异基因文库,克隆和筛选化脓性链球菌高毒力株特异表达基因.方法 采用抑制消减杂交技术(SSH),以从患者体内所分离链球菌为毒力菌株,分离特异表达基因,将其与T载体进行T/A连接构建文库,将连接产物转化感受态大肠杆菌TOP10进行文库扩增后,转化菌液涂布于LB固体平板,构建化脓性链球菌毒力株特异基因消减文库,用斑点杂交初步筛选消减文库后,将获得的阳性克隆进行测序和同源性分析.结果 酶切产物为100～2 000 bp,连接效率大于50%,消减组与非消减组差异明显,成功构建了化脓性链球菌毒力株特异基因消减文库,所得阳性克隆经斑点杂交筛选后测序,与Genebank数据库进行同源性比对,5个未知序列可能为新基因,7个与已知基因有高度的同源性.结论 用SSH及T/A克隆技术成功构建了人源化脓性链球菌高毒力株基因文库,5个未知的新序列有待于进一步的研究.

关键词：链球菌、化脓、抑制消减杂交、毒力基因、基因消减文库

所属期刊栏目：41

分类号：R73;R78

资助基金：南京市卫生局医学科技发展基金资助项目 YKK07047

在线出版日期：2012-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：529-531