10.3969/j.issn.1671-8348.2012.06.002
持续表达的丙型肝炎病毒NS4B激活HepG2细胞内质网应激反应的研究
目的 研究持续表达的丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白4B(NS4B)对HepG2细胞内质网应激反应的影响.方法 NS4B重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)NS4B通过脂质体转染HepG2细胞,G418筛选、基因组PCR和Western blot鉴定稳定转染细胞;RT-PCR检测稳定转染细胞内人X盒结合蛋白1(XBP1) mRNA剪接,荧光素酶试验检测稳定转染细胞内GRP78启动子、XBP1启动子和核因子κB(NF-κB)活性.结果 基因组PCR和Western blot鉴定证实NS4B基因整合到转染HepG2细胞的染色体上,并有效表达;在NS4B稳定转染的HepG2细胞中,检测到XBP1 mRNA剪接、XBP1和Grp78启动子激活、Ca2+稳态变化及NF-κB激活.结论 NS4B在HepG2的稳定表达诱导了内质网应激反应,揭示NS4B可能通过诱导肝细胞内质网应激反应在HCV感染及其致病性中发挥作用.
肝炎病毒属、内质网应激反应、HepG2细胞、NS4B蛋白
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R73;R39
江西省科技支撑计划重点项目2009BNA09400;江西农业大学校基金资助项目2950
2012-04-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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