骨桥蛋白在肝癌细胞中转录后调控的研究

摘要：

目的 分离鉴定在肝癌细胞HepG2 和Hep3B中与骨桥蛋白(OPN)5′非翻译区(5′-UTR)结合后在转录后水平调节OPN mRNA的稳定性的mRNA结合蛋白.方法 利用亲和纯化的方法分离和纯化OPN 5′ UTR结合蛋白,质谱分析消化后的片段以鉴定蛋白;Hep3B细胞瞬时转染真核细胞翻译延长因子 1A(EF1A) siRNA抑制EF1A,HepG2细胞瞬时转染(pcDNA 3.1+EF1A)质粒过表达EF1A,Western blot检测OPN蛋白的表达,real-time PCR 检测OPN mRNA半衰期的变化.结果 质谱分析法确认此结合蛋白为EF1A.在HepG2细胞中过表达EF1A能通过加速OPN mRNA的降解而降低OPN表达;在Hep3B细胞中利用siRNA技术下调EF1A的表达能增强OPN mRNA的稳定性,进而增强OPN的表达.结论 EF1A作为一个去稳定因素作用于OPN 5′UTR,至少部分决定了Hep3B和HepG2细胞中OPN的表达.

关键词：癌、肝细胞、5′非翻译区、肽链延伸、翻译、RNA稳定性、骨桥蛋白

所属期刊栏目：40

分类号：R73;R97

在线出版日期：2012-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：3548-3550