MicroRNA磁性纳米微粒反向转染法提高HepG2转染效率的应用

摘要：

目的 筛选并优化介导微小RNA(miRNA)-221阻遏物转染肝癌HepG2细胞的方法.方法 使用7种转染试剂介导miRNA-221阻遏物在24孔板转染肝癌HepG2细胞.实时定量RT-PCR检测HepG2细胞的miRNA-221,计算敲除miRNA率,继而进行不同试剂用量、不同miRNA阻遏物浓度、正反向转染的对比.结果 Lipofectamine 2000,siPORT Amine transfection 及 combiMAGnetofection在转染40 nmol/L miRNA阻遏物72 h后到均达到了超过50%的miRNA敲除率,其中combiMAGnetofection敲除率最高(55±8)%.转染条件优化后发现反向转染、2 μL combiMAGnetofection及200 nmol/L miRNA 阻遏物的组合miRNA-221沉默效率最高(89±4)%,其细胞存活率为(92±7)%,转染率超过85%.结论 介导miRNA-221阻遏物转染HepG2细胞的最佳试剂是combiMAGnetofection,优化转染条件为使用2 μL的 combiMAGnetofection反向转染200 nmol/L的miRNA阻遏物72 h.

关键词：微RNA、转染、肝肿瘤、微小RNA-221、实时定量RT-PCR

所属期刊栏目：40

分类号：R39;S51

资助基金：广西自然科学基金资助项目 桂科青1013059

在线出版日期：2011-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：3386-3388,后插2