LPS-TLR4复合物内化障碍与LPS介导巨噬细胞活化的实验研究

摘要：

目的 建立内化障碍的小鼠RAW264.7细胞模型,观察脂多糖(LPS)-Toll样受体4(TLR4)复合物内化障碍对巨噬细胞活化作用的影响.方法 应用内化抑制剂单丹磺酰尸胺(MDC),构建内化障碍的小鼠RAW264.7细胞模型;四甲基偶氮唑盐(MTT)检测MDC对巨噬细胞的毒性;应用LPS刺激内化障碍巨噬细胞,流式细胞仪、激光共聚焦显微镜检测LPS-TLR4复合物内化抑制情况;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)蛋白的表达;实时PCR法检测TNF-α及IL-6 mRNA的表达.结果 应用化学抑制剂MDC,在流式细胞仪和激光共聚焦显微镜下,均观察到RAW264.7细胞中LPS-TLR4复合物的内化被显著抑制,成功建立了内化障碍的模型RAW264.7细胞;反映该细胞活化的指标IL-6在蛋白水平和核酸水平均受到明显抑制(P<0.05),而TNF-α的表达在蛋白水平和核酸水平均无显著抑制.结论 LPS-TLR4复合物内化与LPS介导巨噬细胞活化密切相关,内化障碍条件下,由LPS介导的细胞活化表现为对IL-6的释放受到显著抑制,而对TNF-α的释放则抑制不显著.

关键词：内毒素类、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、内化

所属期刊栏目：40

分类号：G64;R39

资助基金：国家自然科学基金面上项目30872681

在线出版日期：2011-09-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：2291-2293,2296