慢病毒载体介导的TGF-β1基因修饰小鼠未成熟树突状细胞的实验研究

摘要：

目的 探讨慢病毒载体介导的转化生长因子β1(TGF-β1)基因修饰小鼠未成熟树突状细胞(iDCs)的方法.方法 体外原代培养小鼠骨髓细胞,经粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)诱导以及抗CD11c抗体包被的免疫磁珠分选获得iDCs,取部分iDCs经肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导为成熟DCs(mDCs),用光学显微镜观察细胞形态,流式细胞术分析细胞的表面分子.将iDCs分为感染组[感染携带绿色荧光蛋白(GFP)与TGF-β1基因的慢病毒颗粒]、感染对照组(感染携带GFP、不携带TGF-β1基因的慢病毒颗粒)及空白对照组(未感染慢病毒颗粒).采用倒置荧光显微镜及酶联免疫吸附试验(ELISA)对各组iDCs中GFP及TGF-β1的表达进行检测.结果 经体外诱导培养及免疫磁珠分选后,获得大量高纯度iDCs,随培养时间延长,iDCs表现出典型的树突状形态; iDCs表面MHCⅡ、CD80及CD86表达水平均明显低于mDCs.感染组iDCs中GFP与TGF-β1蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05).结论 携有TGF-β1基因的慢病毒成功感染小鼠iDCs,并使其表达目的蛋白.

关键词：树突细胞、转化生长因子β、慢病毒感染、转导、遗传、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子

所属期刊栏目：40

分类号：X18;R99

资助基金：国家自然科学基金资助项目30860105

在线出版日期：2011-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1665-1667,封2