重组血红蛋白的原核表达、纯化和鉴定

摘要：

目的 利用大肠杆菌表达载体,表达血红蛋白(Hb)基因,并进行纯化及鉴定.方法 将原核表达载体 pHE 2-Hb 转化入E.Coli JM109,经 IPTG 诱导表达;应用阴离子交换层析、阳离子交换层析分级纯化目的 蛋白,用Western blot鉴定纯化出的目的蛋白.结果 SDS-PAGE分析表明,表达产物的相对分子质量约为67 kD,与理论值相一致;应用阴离子交换层析、阳离子交换层析分级纯化目的 蛋白,Western blot检测表明得到纯度较高的目的蛋白.结论 利用大肠杆菌表达系统,获得了较高纯度的目的蛋白,为进一步研究Hb的生物传氧机制研究和以Hb为基础载氧药物的研究提供重要基础和研究依据,并将为血液替代品和相关疾病的治疗研究奠定研究基础.

关键词：血红蛋白、原核表达、纯化

所属期刊栏目：39

分类号：R331.141;R446.1(人体生理学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30470877;河南省重点科技攻关项目092102310006

在线出版日期：2010-12-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：2889-2891