10.3969/j.issn.1671-8348.2010.20.001
FasL和Der p2双基因共表达真核表达载体的构建及其在树突状细胞中的表达
目的 构建小鼠FasL基因和屋尘螨主要抗原Der p2双基因共表达载体,并检测其在树突状细胞(DC)中的表达.方法 以plambd-Der p2为模板扩增Der p2基因,双酶切pIRES2EGFP和Der p2基因,将Der p2基因克隆入pIRES2EGFP得pIRES2EGFP-Der p2.双酶切pMD18T-FasL质粒获得FasL片段,克隆入pIRES2EGFP-Der p2,获得FasL和Der p2共表达重组载体pIRES2EGFP-FasL-Der p2,采用酶切及测序鉴定重组质粒.将重组质粒转染DC,采用RT-PCR和Western Blot法检测FasL和Der p2基因的mRNA及蛋白水平的表达.结果 测序证实FasL和Der p2基因序列完全正确.重组质粒转染DC后,能表达FasL和Der p2 的mRNA和蛋白.结论 成功构建FasL和Der p2双基因共表达重组载体pIRES2EGFP-FasL-Der p2,转染DC后能在体外正确表达FasL和Der p2基因.
FasL、Der p2、共表达、树突状细胞
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R562.25;R446.61(呼吸系及胸部疾病)
国家自然科学基金资助项目30470772
2010-12-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
2697-2699,2703