腺病毒介导血管平滑肌细胞转染表达p27基因的研究

摘要：

目的 体外培养大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)并以腺病毒介导转染表达p27.方法 取大鼠主动脉血管.以常规组织块贴壁法培养VSMC.用位置特异性重组方法 构建带p27基因的复制缺陷型腺病毒栽体(AdCMV-p27),经鉴定、扩增,以获取高滴度AdCMV-p27转染液,体外转染VSMC.用RT-PCR方法 检测p27 mRNA表达,免疫细胞化学法检测p27蛋白表达,流式细胞仪检测p27细胞表达率.结果 构建的AdCMV-p27体外转染培养VSMC表达率为85.81%.以免疫细胞化学、流式细胞仪和RT-PCR检测p27表明,转染后p27表达明显增强,并随表达时间延长而增加,24h达峰值.结论 腺病毒栽体可较高效率介导p27在体外培养的VSMC转染表达.转染表达p27的VSMC可作为研究有丝分裂原对其增殖、迁移以及凋亡等生物学行为影响的良好细胞模型.

关键词：p27、血管平滑肌细胞、腺病毒

所属期刊栏目：37

分类号：R365.541(病理学)

在线出版日期：2008-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：621-623,插1