人肠三叶因子毕赤酵母表达载体的构建及稳定整合菌珠的筛选

摘要：

目的构建hITF毕赤酵母分泌型表达载体,获得稳定整合酵母菌珠,为大量获得重组hITF、进行功能研究奠定基础.方法通过PCR获得hITFcDNA 片段,将目的基因插入酵母表达载体pPICZαA分泌信号下游,得到重组载体pPICZαA-hITF .SacⅠ线性化后氯化锂转化进入X-33,Zeocin筛选转化酵母菌,PCR鉴定目的基因,MD、MM鉴定基因型.结果经测序证实PCR扩增的hITFcDNA与基因文库中的完全一致并准确插入酵母表达载体pPICZαA中,氯化锂转化后,PCR鉴定证明重组载体整合进入酵母基因组中,基因型鉴定表明获得的酵母菌株均为Mut+.结论成功构建出酵母表达载体pPICZαA-hITF,获得稳定整合hITFcDNA的酵母菌株,为hITF的大量表达及其功能研究奠定了基础.

关键词：人肠三叶因子、毕赤酵母、分泌表达

所属期刊栏目：35

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：中国科学院资助项目30200294;科技部科研项目2005CB522601

在线出版日期：2006-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：918-920