人端粒酶逆转录酶基因和EGFP共表达真核表达载体的构建及鉴定

摘要：

目的构建并鉴定人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)双基因共表达重组真核表达质粒.方法扩增pGRN145质粒并酶切回收hTERT片断,利用基因重组技术将hTERT连接到pIRES2-EGFP载体中并酶切鉴定.用NucleofectorTM技术将构建的重组质粒转染NIH3T3细胞系.结果成功构建了hTERT和EGFP双基因共表达重组真核表达质粒,并成功转染了NIH3T3细胞.结论重组质粒hTERT-pIRES2-EGFP可以被成功导入细胞并表达EGFP,为鉴定hTERT转染成功与否及阳性细胞筛选提供了方便.

关键词：hTERT、双基因共表达、pIRES2-EGFP

所属期刊栏目：33

分类号：Q556.9(酶)

资助基金：国家自然科学基金30300090;国家重点实验室基金

在线出版日期：2004-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1206-1208