10.3969/j.issn.1674-2257.2016.04.004
一种基于OmpA的分泌型原核表达载体的构建及应用
目的 构建大肠杆菌周质分泌型表达载体并验证其表达效果.方法 以pUC18-lpp为基础载体,构建含有核糖体结合元件(RBS)、信号肽(OmpA)、多克隆位点(MCS)的分泌型表达载体pUC-OmpA;通过分子克隆获得含有密码子优化的人生长激素(hGH)编码序列的pUC-OmpA-hGH,转化大肠杆菌JM109菌株并验证周质分泌性质.结果 经IPTG诱导后,SDS-PAGE、Western印迹分析结果显示周质空间有hGH重组表达产物,分子量约为22 kD,大小与预期一致,周质hGH约占菌体总hGH的43%.结论 成功构建了基于OmpA信号肽的周质分泌型表达系统,为实现生物活性蛋白的原核表达奠定了基础.
原核表达、周质分泌、信号肽
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R34(人体生物化学、分子生物学)
四川省科技厅应用基础研究项目;国家级大学生创新创业训练计划项目;成都医学院大学生创新实验项目
2016-10-31(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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