幽门螺杆菌多靶点疫苗工程菌BIB发酵及纯化工艺研究

摘要：

目的 初步建立重组幽门螺杆菌多靶点疫苗工程菌(BIB)的高密度发酵及其蛋白纯化工艺.方法 以摇瓶发酵结果为基础,放大工艺至50 L发酵罐中,对影响目的蛋白收率的因素如发酵培养基、工作种子接种量、诱导剂浓度、诱导起始时间、诱导持续时间及诱导剂添加方式等进行优化验证;并利用rBIB蛋白高等电点特性(pI=9.05),在pH 7.0～7.5的磷酸盐缓冲液中目的蛋白带正电荷,采用阳离子交换层析进行纯化,对阳离子交换层析填料及纯化缓冲液的pH进行优化.结果 经高密度发酵后BIB菌体产量为70 g/L,蛋白表达量为32％;rBIB蛋白经阳离子交换层析纯化后其纯度为91.8％.结论 该工艺的初步建立为深入研究rBIB蛋白性质及其规模化生产奠定了基础.

关键词：幽门螺杆菌、疫苗、高密度发酵、阳离子交换层析、尿素酶B亚单位

所属期刊栏目：9

分类号：R392

资助基金：四川省科技厅科技支撑计划2014SZ0036

在线出版日期：2014-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：538-544