阿胶肽图前处理胶原蛋白酶解条件研究

摘要：

目的:建立标准化的阿胶蛋白酶解条件.方法:分别通过加热法、超声法及液氮碾磨法提取阿胶蛋白;通过二氯甲烷-环己烷萃取和超滤法纯化阿胶蛋白;采用序列分析级胰酶进行酶解,分别考察4个酶解参数(温度、时间、酶的剂量和pH值)对酶解结果的影响,通过Tricine-SDS-PAGE法检测酶解效果.结果:超声法溶解阿胶样品效果相对较好,酶解参数最佳条件为:酶解温度38℃,pH 8.0,酶解时间12h以上,底物与酶体积比在4∶1～1∶1范围内,计算酶活为0.1～0.4 mU (mg/μmol).结论:建立了标准化的阿胶肽图前处理胶原蛋白胰酶酶解条件,为基于肽图谱法阿胶鉴别及质量控制方法的建立打下基础.

关键词：阿胶、肽图鉴别、酶解条件

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分类号：R282.71;R284.2(中药学)

资助基金：成都中医药大学科研基金030021075;四川省中医药管理局2016Q056

在线出版日期：2018-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：14-17