日本结缕草ZjERF1的克隆、转录激活活性、亚细胞定位及表达分析

摘要：

ERF转录因子是植物体内最大的一类转录因子之一,在调控植物生长发育和响应环境胁迫等方面发挥着重要的作用.研究利用RACE技术,从日本结缕草中克隆到Zj ERF 1基因(GenBank登录号为MH294481),开放阅读框为630 bp,编码209个氨基酸残基,含有1个高度保守的AP2结构域,属于典型的ERF转录因子.利用染色体步移技术,成功获得ATG上游1581 bp的启动子序列,生物信息学分析表明其中含有多个响应MeJA等激素和非生物胁迫的作用元件.为分析其转录激活特性,构建了pGBKT7-ZjERF1载体,转化Y2 HGold酵母感受态细胞,结果表明其具有较强的转录激活活性.为探析其亚细胞定位情况,成功构建35S::Zj ERF 1:YFP载体,本生烟草瞬时表达结果证明ZjERF1定位于细胞核.为进一步研究Zj ERF 1的表达特征,利用实时荧光定量的方法进行了验证,结果表明:Zj ERF 1在日本结缕草茎中表达量最高,并且与叶片的衰老程度呈正相关性;此外Zj ERF 1的表达可受200μmol·L-1 ET、10μmol·L-1 MeJA和300 mmol·L-1 NaCl处理的诱导,但受到20％PEG4000的抑制.研究表明Zj ERF 1是一个可参与多种信号转导途径的优良转录因子,为进一步探索Zj ERF 1基因的功能及其调控机制奠定了基础.

关键词：日本结缕草、ERF转录因子、转录激活、亚细胞定位、表达分析

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资助基金：北京市农林科学院科技创新能力建设专项KJCX20161502-1、KJCX20170110;中国博士后基金2017M620677;北京市博士后基金2017-ZZ-087;北京市科技计划D171100007217001

在线出版日期：2019-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：56-65