禽流感血凝素HA超表达载体的构建及高表达百脉根的获得

摘要：

为提高外源抗原蛋白的表达水平，根据已得到的 HA-LTB融合基因，通过添加双增强子CaMV35S启动子、增强子Ω序列、内质网滞留信号KDEL序列及加长poly（A）序列等表达调控元件，构建 HA-LTB高效融合植物表达载体。利用农杆菌介导方法转化百脉根，获得转基因阳性植株21株，经PCR 和RT-PCR 检测表明 HA-LTB融合基因已整合到百脉根基因组中。利用ELISA检测转基因植株，结果表明LTB免疫佐剂与 HA抗原蛋白均具有免疫原性，LTB最高表达量达到0．086μg/mg（蛋白粗提液），HA最高表达量达到0．25μg/mg（蛋白粗提液）。通过植物表达载体的设计和构建，使禽流感血凝素在百脉根中的表达量得到了显著提高，为禽流感可饲疫苗的研制奠定了基础。

关键词：百脉根、载体构建、H A抗原蛋白、LTB免疫佐剂、高表达

分类号：S851.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点基础研究发展计划“973”项目2014CB138701;国家自然科学基金资助项目31372361资助。

在线出版日期：2014-09-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：138-145