小叶锦鸡儿SSR-PCR体系优化及应用

摘要：

为建立适宜小叶锦鸡儿(Caragana microphylla)SSR-PCR的反应体系,利用正交试验设计L16(45),对模板DNA、Mg2+、dNTP、引物和Taq DNA聚合酶的浓度进行五因素四水平优化筛选,确立最佳反应体系和扩增程序.即在25μL反应体系中包括:40 ng模板DNA,3 mmol/L Mg2+,300 μmol/L dNTP,0.6 μmol/L引物,1 UTaq DNA聚合酶,1×Buffer.扩增反应程序为:94℃ 10 min;94℃ 45 s,65℃ 1 min,72℃ 1 min,10个循环,每循环的复性温度递减1℃;94℃ 45 s,55℃ 1 min,72℃ 1 min,30个循环:72℃ 10 min,4℃保存.应用该优化体系对小叶锦鸡儿种质资源及不同引物进行了检验及筛选.本研究表明,该体系的建立为今后利用SSR标记对小叶锦鸡儿属遗传多样性研究、遗传图谱构建及种质资源鉴定等研究工作提供依据.

关键词：小叶锦鸡儿、SSR-PCR体系优化

所属期刊栏目：28

分类号：S541+.9(饲料作物、牧草)

资助基金：现代农业产业技术体系建设专项资金;"十一五"科技支撑2008BADB3B01

在线出版日期：2015-07-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：399-403