人骨髓间充质干细胞通过YAP影响人脂肪肉瘤SW872细胞的生物学行为

摘要：

目的:观察人骨髓间充质干细胞(hMSCs)条件培养基(CM)与人脂肪肉瘤SW872细胞共培养后对肿瘤细胞增殖和迁移能力的影响,探讨hMSCs CM对脂肪肉瘤细胞的作用及可能的作用机制.方法:体外培养hMSCs,采用慢病毒方法分别转染慢病毒空载体shNS(对照组)和慢病毒shRNA Yes相关蛋白(YAP)(shYAP-hMSCs组),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测各组hMSCs中YAP mRNA和蛋白表达水平,提取CM.体外培养SW872细胞,分为对照组(正常培养)、hMSCs CM组和shYAP-hMSCs CM组.采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,细胞划痕实验检测各组细胞划痕愈合率,Western blotting法检测各组细胞中YAP、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和细胞周期蛋白D1(cyclinD1)蛋白表达水平.结果:与对照组比较,shYAP-hMSCs组hMSCs中YAP mRNA和蛋白表达水平降低(P＜0.01),表明成功构建了 shYAP-hMSCs稳定转染细胞株.CCK-8法,与对照组比较,hMSCs CM组SW872细胞增殖活性升高(P＜0.05),shYAP-hMSCs CM组SW872细胞增殖活性降低(P＜0.01);流式细胞术,与对照组比较,hMSCs CM组SW872细胞凋亡率无明显变化(P＞0.05),shYAP-hMSCs CM组SW872细胞凋亡率升高(P＜0.01);细胞划痕实验,与对照组比较,hMSCs CM组SW872细胞划痕愈合率升高(P＜0.05),shYAP-hMSCs CM组SW872细胞划痕愈合率降低(P＜0.01);Western blotting法,与对照组比较,hMSCs CM组SW872细胞中YAP、MMP-9和cyclinD1蛋白表达水平差异无统计学意义(P＞0.05),shYAP-hMSCs组SW872细胞中YAP、MMP-9和cyclinD1蛋白表达水平降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:hMSCs参与调控人脂肪肉瘤SW872细胞增殖和迁移,其机制可能与YAP表达有关.

关键词：骨髓间充质干细胞、条件培养基、脂肪肉瘤、细胞增殖、细胞迁移、Yes相关蛋白

所属期刊栏目：50

分类号：R73-3(肿瘤学)

资助基金：广东省科技厅区域联合基金重点项目;广东省深圳市科技创新委员会科技计划项目

在线出版日期：2024-08-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1000-1008