1-磷酸神经酰胺转运蛋白对人口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生物学行为的影响
目的:探讨1-磷酸神经酰胺转运蛋白(CPTP)对人口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生物学行为的影响,阐明其相关作用机制.方法:体外培养HSC-3细胞,分为对照组和实验组,分别采用pFlag-CMV4和pFlag-CPTP质粒进行转染,采用抗性筛选法构建稳定转染(稳转)CPTP的细胞.采用Western blotting法和免疫荧光法检测2组细胞中CPTP蛋白表达水平,采用克隆形成实验和CCK-8法检测各组细胞中克隆形成数和细胞增殖活性,细胞划痕实验检测2组细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测 2组细胞中侵袭细胞数.小鼠随机分为对照组和实验组,分别注射 pFlag-CMV4 稳转HSC-3细胞和pFlag-CPTP稳转HSC-3细胞,制备小鼠皮下移植瘤模型,检测2组小鼠移植瘤体积和质量.采用生物信息学方法对头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)组织中CPTP差异表达基因进行富集分析.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组细胞中p53、血小板反应蛋白1(THBS1)和细胞周期蛋白G2(CCNG2)mRNA表达水平.结果:与对照组比较,实验组细胞中CPTP蛋白表达量明显增加.与对照组比较,实验组细胞中克隆形成数明显增加(P<0.01),细胞增殖活性和划痕愈合率明显升高(P<0.05或P<0.01),侵袭细胞数明显增加(P<0.01).注射肿瘤细胞2、3和4周,与对照组比较,实验组小鼠移植瘤体积明显增加(P<0.05或P<0.01);注射肿瘤细胞4周,与对照组比较,实验组小鼠移植瘤质量明显增加(P<0.05).生物信息学分析,在HNSCC组织中CPTP的作用可能是通过p53等信号通路介导.与对照组比较,实验组细胞中p53、THBS1和CCNG2 mRNA表达水平明显降低(P<0.01).结论:过表达CPTP能促进HSC-3细胞增殖、迁移、侵袭和成瘤能力,CPTP通过抑制p53信号通路促进口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞生长.
口腔鳞状细胞癌、1-磷酸神经酰胺转运蛋白、细胞侵袭、信号通路
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R734.2(肿瘤学)
国家自然科学基金;广西壮族自治区科技厅自然科学基金项目
2023-08-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共9页
875-883
